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News Center流式細胞術(shù)評價腫瘤化療療效的作用流式細胞術(shù)不僅可對惡性腫瘤DNA含量進行分析,還可根據(jù)化療過程中的腫瘤DNA分布組方圖的變化去評估療效,了解細胞動力學(xué)變化,對腫瘤化療具有重要的意義。過去傳統(tǒng)的3H-胸腺嘧啶核苷酸放射自顯影計數(shù)標記指數(shù)的方法,由于費時、工序復(fù)雜等原因,不能適應(yīng)臨床大量標本的測定。流式細胞術(shù)可快速分析,并有程序化的計算機快速計算出各時相的百分比率,顯示出腫瘤細胞群體的增殖能力。特別是近年來發(fā)展起來的DNA-Brdu摻入技術(shù)和抗Brdu的單抗熒光免疫技術(shù)在流式技術(shù)...
石蠟包埋組織單細胞樣品制備方法存在的問題石蠟包埋組織單細胞制備方法的建立,使流式細胞術(shù)在腫瘤研究中得到更加廣泛的應(yīng)用。主要存在如下問題。1、樣品中的碎片較多,所獲得的DNA組方圖質(zhì)量不及新鮮組織好,組方圖的細胞峰較寬,細胞峰CV值較大。2、異倍體率較少。由于組方圖的細胞峰CV值增大,一些接近于二倍體的DNA異倍體峰位被掩蓋。3、S期細胞百分比不如新鮮組織的S期計算準確,百分比計數(shù)往往偏高,這仍然與細胞峰增寬有關(guān)。4、DNA二倍體標準不穩(wěn)定。在石蠟包埋腫瘤DNA倍體分析研究中,...
兔ELISA試劑盒盡量保持室溫20-25℃,避免在通風口操作防止溫度過低,過熱和/或者蒸發(fā)。適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞上清液、尿液等等多種標本類型,不要在陽光直射下實驗,防止過熱及蒸發(fā)。在孵育期間,如果工作臺溫度過低,應(yīng)該鋪墊若干紙巾或者其他物料,水質(zhì)量很重要,確保使用蒸餾或者去離子水,不要使用過期的兔ELISA試劑盒,加入樣品或者試劑到空的微孔板時,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接觸。孵育時間的計算越規(guī)范越好,兔ELISA試劑盒保持添加標準品的一致性,先添加標準品后添加...
免疫和腫瘤胞測定及分選中的應(yīng)用細胞分選是FCM技術(shù)一項特殊的功能,在免疫研究及臨床應(yīng)用上占有重要地位。它的主要作用一是分選,二是鑒定,而分選又必須同鑒定結(jié)合進行。只要有相應(yīng)的熒光標記,就可以分離出任何所需要的細胞群體,尤其是含量但對鑒定又非常主要的細胞,純度可達95%以上。細胞周期中靜止期細胞的分離R.Schwarting等制備一株抗核抗原的單克隆抗體Ki-67,它同細胞周期中G1、S、G2M期所有具增殖性的細胞結(jié)合,但不同G0期細胞反應(yīng),這樣就可以用分選技術(shù)把靜止期細胞分離...
細胞膜的流動性或微粘度膜的流動性或者微粘度,可以通過測量結(jié)合到膜雙分子層中的疏水熒光探針的熒光偏振來研究。因為熒光分子吸收偏振光的幾率和發(fā)射熒光的偏振度與熒光分子相對于激發(fā)光偏振面的空間取向有關(guān)。若以線偏振光激發(fā)隨機取向的熒光分子,那么,與激發(fā)光偏振面取向一致的那些熒光分子具有zui大的吸收。由于多數(shù)熒光分子的激發(fā)太壽命是幾毫微秒的數(shù)量級,已經(jīng)吸收了偏振光的一部份熒光分子,到它們發(fā)射熒光時,已經(jīng)偏離開它們的原始取向,使得發(fā)射出熒光偏振面的方向?qū)l(fā)生變化。若用兩個互相垂直的偏振...
抗體和其它分子的共價標記以共價鍵結(jié)合的熒光染料FITC既能標記細胞內(nèi)總蛋白、又能更廣泛地標記各種特異性配體。這些配體是能與不同的細胞結(jié)構(gòu)很強很特異地結(jié)合的各種大分子和小分子,如蛋白、多聚核苷酸、脂類以及其他生物分子、被標記的特異性配體能夠探測很多種細胞結(jié)構(gòu)和功能的參量。例如:被標記的外源凝集素可檢測細胞表面糖;被標記的抗體可檢測表面抗原;被標記的多聚陽離子可檢測表面電荷,被標記的激素、生長因子、神經(jīng)遞質(zhì)和病毒等可以檢測細胞受體;被標記的大分子、微生物或者塑料微球可檢測細胞內(nèi)吞...
Gram-Twort革蘭染色液產(chǎn)品簡介:革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生ChristainGram于1884年所發(fā)明,是細菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,亦是一種復(fù)染法。未經(jīng)染色的細菌,由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色后細菌與環(huán)境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征,用以分類鑒定。通過此法染色可將細菌鑒別為革蘭陽性菌(G)和革蘭+陰性菌(G)兩大類。細菌的不同顯色反應(yīng)是由于細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異,主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)...
熒光測量熒光信號是由對細胞進行染色的特異性熒光染料受激后發(fā)射的。熒光波長與激發(fā)光波長不同且強度較弱,為此就要使用濾片以濾除非熒光信號并使用靈敏的探測器。下面我們將分別進行討論。光源常用的光源有弧光燈和激光。弧光燈的結(jié)構(gòu)簡單、價格便宜、維修容易,但在單一譜線上的功率較弱。激光單色性好、功率強大、不易散焦,但結(jié)構(gòu)復(fù)雜、價格昂貴、維修困難。至于選擇某種光源的某條譜線做為激發(fā)光源,主要是依據(jù)被激發(fā)的物質(zhì),例如細胞的自身熒光物質(zhì)或熒光染料的激發(fā)光譜而定。光源的譜線愈接近被激發(fā)物質(zhì)的激發(fā)...