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Goldner三色染色液

更新時(shí)間:2018-10-24點(diǎn)擊次數(shù):1271

Goldner三色染色液

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

骨染色方法有很多種,例如甲苯胺藍(lán)法、阿利新藍(lán)法、番紅O 法、Goldner三色染色法等。Goldner 三色染色又稱戈德納三色染色,與 Masson 三色染色類似,三色染色通常是指染胞核和能選擇性的顯示膠原纖維和肌纖維。

三色染色液染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān):分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn),小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織;而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。該染液多用于骨類物質(zhì)的染色,對(duì)細(xì)胞染色效果較好,尤其適用于代謝性疾病(Paget 病、骨性營(yíng)養(yǎng)不良等)的研究,以評(píng)估成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的活性,并容易辨認(rèn)骨髓中的轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞。

產(chǎn)品組成

產(chǎn)品

6×50ml

100ml

Storage

試劑(A) :Weigert A1:Weigert 染液 A

25ml

50ml

RT 避光

鐵蘇木素染色液 A2: Weigert 染液 B

25ml

50ml

RT

臨用前,取 A1、A2 等量混合即為 Weigert 鐵蘇木素染色液,不宜提前配制。

試劑(B): 酸性分化液

50ml

100ml

RT

試劑(C): Acid Ponceau 染色液

50ml

100ml

RT 避光

試劑(D): 弱酸溶液

50ml

100ml

RT

試劑(E): Orange G 染色液

50ml

100ml

RT 避光

試劑(F): 亮綠染色液

50ml

100ml

RT 避光

使用說(shuō)明書(shū)

一份

自備材料:

1、系列乙醇

2、蒸餾水

操作步驟 (僅供參考)

1、切片二甲苯脫蠟或脫塑料,乙醇漂洗,入水。

2、入配制好的 Weigert 鐵蘇木素染色 20~30min。

3、流水沖洗 1min,用酸性分化液迅速分化(一般<5s)。

4、流水沖洗 5min,蒸餾水稍洗。

5、入 Acid Ponceau 染色液染色 5min。

6、在上述過(guò)程中按蒸餾水:弱酸溶液=4:1 比例配制弱酸工作液,用弱酸工作液洗 15~30s。

7、入 Orange G 染色液染色,直至 Ponceau 染色液,一般需要 3~10min。

8、用配制好的弱酸工作液沖洗 15~30s。

9、直接入亮綠染色液中染色 5min。

10、用配制好的弱酸工作液沖洗 3 次,每次 15s。

11、蒸餾水沖洗,吸干或晾干,無(wú)水乙醇快速脫水,中性樹(shù)膠封固。

染色結(jié)果 

礦化骨

綠色

類骨質(zhì)

橙色-紅色

軟骨

 

細(xì)胞核

藍(lán)色-灰色

注意事項(xiàng):

1、切片脫蠟應(yīng)盡量干凈。固定起著重要的作用,使用不同的固定液可延或縮短染色時(shí)間。

2、取A1、A2等量混合即為Weigert 鐵蘇木素染液,一般24h失去染色力。

3、酸性分化時(shí)間應(yīng)根據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。

4、弱酸溶液可使色彩更清晰鮮艷,如使用量大可自行配制0.1~1%乙酸溶液予以替代。

5、Orange G染色液染色時(shí)在鏡下控制,以麗春紅脫去為準(zhǔn)。

有效期12 個(gè)月有效。