基本信息

• 產(chǎn)品名稱： Neuro-2a細胞;小鼠腦神經(jīng)瘤細胞
• 細胞數(shù)量： 1*10^6
• 組織來源： 腦組織
• 細胞種屬： 小鼠源
• 生長特性： 貼壁
• 培養(yǎng)基： Eagle's Minimum Essential Medium
• 形態(tài)特征： 形態(tài)學神經(jīng)元和變形細胞干細胞
• 傳代方法： 1：3至1：6
• 培養(yǎng)條件： 胎牛血清至終濃度為10％。環(huán)境：空氣，95％;二氧化碳（CO2），5％；溫度，37℃
• 細胞描述： 神經(jīng)母細胞瘤的疾病 A株 應用 該細胞系是合適的轉(zhuǎn)染宿主。
• 細胞凍存： 液氮凍存（凍存液基礎培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO）
• 細胞運輸： 干冰運輸（2ml凍存管）或活細胞運輸（T25瓶）

  注意事項

  凍存細胞接收后的處理：

  1.干冰運輸，收到細胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復蘇；
  2.收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)*揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯(lián)系。

  復蘇細胞接收后的處理：

  1.收到細胞后，請首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液，培養(yǎng)液是否混濁，如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請立即拍照把圖片發(fā)給我們。
  2.75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認細胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
  3.建議收到當天不要消化處理，如果細胞長滿90%，可選擇傳代處理。
  4.如您收到細胞3天內(nèi)沒有反饋相關問題，出現(xiàn)的細胞問題將不提供免費重發(fā)服務。

  細胞培養(yǎng)方法：

  1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
  ①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
  ②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
  ③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
  ④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
  ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
  ⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
  2、細胞復蘇：
  ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
  ②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
  3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
  ①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
  ②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
  ③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
  ④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。