技術(shù)文章
Technical articles產(chǎn)品描述
LDL是由極低密度脂蛋白(VLDL)轉(zhuǎn)變而來,主要功能是把膽固醇運輸?shù)饺砀魈幖毎?,運輸?shù)礁闻K合成膽酸,其可用于研究受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用過程,尤其是在動脈粥樣硬化等疾病中,其血漿來源的LDL可用于研究LDL在功能和代謝中的氧化作用。
氧化的LDL(Ox-LDL)是修飾LDL中的一類。修飾的LDL除包括氧化修飾的LDL外,還包括乙酰化LDL及丙二醛(MDA)、4-羥烯酸(4-HNE)直接結(jié)合的LDL,這些未經(jīng)氧化修飾而僅經(jīng)一般化學(xué)修飾的LDL稱為衍化的LDL。不同于衍化的LDL,Ox-LDL 的生理學(xué)*性表現(xiàn)在:1)在細胞生理功能影響上,Ox-LDL可誘發(fā)細胞毒性作用,影響花生四烯酸的代謝,抑制膽固醇酯化作用等,但衍化的LDL無上述效應(yīng);2)Ox-LDL消耗LDL內(nèi)源性抗氧化物質(zhì),使LDL上的維生素E含量下降,而MDA-LDL無上述效應(yīng);3)氧化修飾涉及脂質(zhì)過氧化反應(yīng),LDL中的PUFAs被氧化。MDA對LDL修飾,是直接和ApoB-100結(jié)合成希夫氏堿,脂質(zhì)過氧化反應(yīng)輕微;4)氧化LDL在氧化程度低時,ApoB降解;在氧化程度高時,ApoB又可發(fā)生再聚合。MDA對LDL的修飾,ApoB無降解、聚合反應(yīng)發(fā)生;5)Ox-LDL 產(chǎn)生的熒光峰波長為430nm,而MDA -LDL的熒光峰波長為460nm。Ox-LDL不經(jīng)LDL受體代謝,由清道夫受體識別、結(jié)合、內(nèi)吞飲入細胞并喪失正常的膽固醇代謝途徑,引起細胞內(nèi)脂質(zhì)沉積,泡沫樣變。
LDL氧化修飾的方式有很多種,常見的有:1)細胞介導(dǎo)的LDL氧化修飾,又稱為生物氧化修飾的LDL。如內(nèi)皮細胞,巨噬細胞,單核細胞都具有此功能;2)過度金屬離子介導(dǎo)的LDL氧化修飾,如Ca2+,F(xiàn)e2+等;還有其他形式的氧化修飾,包括物理方法如紫外線,或過氧化物酶催化。
翊圣提供的人源氧化低密度脂蛋白(Human Oxidized Low Density Lipoprotein,Ox-LDL),是由過度銅離子介導(dǎo)人血漿來源的LDL進行的氧化修飾。新鮮血漿經(jīng)檢測為HCV,HBsAg和HIV陰性。本產(chǎn)品為無菌包裝,可以直接稀釋使用。本Ox-LDL廣泛用于脂質(zhì)代謝的研究。另外我們還提供High Ox-LDL(貨號:20608ES03)可產(chǎn)生明顯的氧化應(yīng)激,能夠用來誘導(dǎo)細胞凋亡,并建立細胞損傷模型。除提供Ox-LDL,我們還提供人源乙?;疞DL(Ac-LDL),以及熒光標(biāo)記的LDL。
制備方法
在含10 μM Cu2SO4的PBS溶液中氧化人LDL,加入過量的EDTA終止氧化反應(yīng)。
產(chǎn)品性質(zhì)
蛋白純度(Purity) | >97%(瓊脂糖凝膠電泳) |
蛋白濃度(Concentration) | 1.0~3.9 mg/ml(Lowry法) |
外觀(Appearance) | 無色乳狀液體 |
緩沖液配方(Buffer Formulation) | <0.1 μM EDTA-Na2 in PBS, pH 7.4 |
氧化程度(Oxidized Ratio) | TBARS檢測(根據(jù)MDA的含量反映LDL的氧化程度) 起始LDL:0.1~0.5 nmol MDA/mg蛋白 Ox-LDL:20~26 nmol MDA/mg蛋白 |
稀釋方法
根據(jù)實驗需要用PBS磷酸鹽緩沖液或細胞培養(yǎng)液稀釋即可。
運輸與保存方法
冰袋運輸。
4℃保存,建議避光,保存時間不要超過6周。千萬不可凍存!!
注意事項
1)該產(chǎn)品經(jīng)長期保存后會看到少量沉淀,屬于正?,F(xiàn)象。低速離心1 ~2min去除沉淀物,得到澄清液。
2)Ox-LDL工作液很不穩(wěn)定,強烈建議根據(jù)單次需要用量,新鮮配置工作液。
3)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。