技術(shù)文章
Technical articles主要用途
石蠟切片糖原高碘酸希爾(PAS)法染色試劑是一種旨在使用標(biāo)準化的化學(xué)分離石蠟方法的基礎(chǔ)
上,通過高碘酸氧化糖原中的糖基為乙醛,使用品紅亞硫酸鹽染料,產(chǎn)生品紅色或紫紅色,來分析組織樣
本中糖原成分經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由大師級科學(xué)家精心改良傳統(tǒng)方法、成功實驗證明的。主
要適用于各種石蠟包埋組織切片中的糖原成分檢測。尤其可用于分析未分化鱗狀細胞腫瘤(squamous cell
carcinoma)基底膜以及各種不同器官上皮分泌的酸性粘液物質(zhì)(mucosubstance)。產(chǎn)品即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。
技術(shù)背景
糖原(glycogen)存在于皮膚、肝臟、甲狀旁腺(parathyroid gland)、骨骼肌和心肌中。高碘酸(periodic acid)可以氧化糖原中的多糖(polysaccharide)糖基,包括乙二醇(1,2-glycol)中的碳原子,成為乙醛基團(aldehydegroup),與希爾試劑(Schiff’s Reagent),即品紅亞硫酸鹽染料(fuchsin sulfite)發(fā)生反應(yīng),呈現(xiàn)品紅色(magenda)或紫紅色沉淀產(chǎn)物(品紅乙醛;aldehyde fuchsin),表明糖原陽性。
產(chǎn)品內(nèi)容
脫蠟液(Reagent A) XX 毫升
補水液A(Reagent B) XX 毫升
補水液B(Reagent C) XX 毫升
補水液C(Reagent D) XX 毫升
清理液(Reagent E) XX 毫升
氧化液(Reagent F) XX 毫升
染色液(Reagent G) XX 毫升
產(chǎn)品說明書 1 份
保存方式
保存在室溫下;染色液(Reagent F),嚴格密封瓶口,避免光照;試劑具有腐蝕性,注意操作安
全;有效保證 6 月
用戶自備
通用型蘇木素復(fù)染試劑盒(GMS80067.1):用于常規(guī)染色后復(fù)染
小型染色缸:用于組織染色操作
光學(xué)顯微鏡:用于組織染色后觀察分析
實驗步驟
一、 脫蠟處理
1. 取出 10 片待測的石蠟包埋的 5 微米厚組織切片
2. 放進 80℃烘箱,孵育 30 分鐘
3. 室溫下靜置 15 分鐘
4. 按下表依次放進小染色缸里孵育
染色缸 孵育時間
XX 毫升 脫蠟液(Reagent A) 15 分鐘
XX 毫升 脫蠟液(Reagent A) 15 分鐘
XX 毫升 脫蠟液(Reagent A) 15 分鐘
XX 毫升 補水液 A(Reagent B) 3分鐘
XX 毫升 補水液 B(Reagent C) 3分鐘
XX 毫升 補水液 C(Reagent D) 3分鐘
XX 毫升 清理液(Reagent E) 3分鐘
5. 小心移去切片上的 清理液(Reagent E)
二、 樣本氧化處理
1. 小心加上XX 微升 氧化液(Reagent F),鋪滿整個樣品表面
2. 室溫下,孵育 5 分鐘
3. 小心移去切片上的 氧化液(Reagent F)
4. 小心加上XX 微升 清理液(Reagent E),清洗樣品表面
5. 小心移去切片上的 清理液(Reagent E)
6. 重復(fù)實驗步驟 4 至 5 一次
三、 樣本染色處理
1. 小心加上XX 微升 染色液(Reagent G),鋪滿整個切片樣品表面
2. 室溫下孵育XX 分鐘;或直至可見深紅色
3. 小心移去切片上的 染色液(Reagent G)
4. 室溫下,小心將切片置入XX 0 毫升 清理液(Reagent E)中孵育 5 分鐘
5. 小心移去切片上的 清理液(Reagent E)
四、 (選擇步驟)樣本復(fù)染處理
1. 樣本復(fù)染處理(建議使用通用型蘇木素復(fù)染試劑盒-GMS80067.1)
2. 放上蓋玻片或封片
3. 即刻在一般光學(xué)顯微鏡下觀察:呈現(xiàn)紫紅色或品紅色為糖原陽性組織,細胞核呈現(xiàn)藍色(復(fù)染)
注意事項
1. 本產(chǎn)品為 50 次操作
2. 操作時,須帶手套
3. 石蠟包埋前,組織切片固定,避免使用甲醛類固定劑
4. 所有操作在室溫下進行
5. 試劑可以重復(fù)使用
6. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
7. 染色液(Reagent G)出現(xiàn)沉淀,可以溫?zé)?、攪拌或過濾后使用
8. 染色液(Reagent G)須密封避光,如果變成紅色,則影響染色效果
9. 試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面
10.樣品染色避免過度,肉眼可見深紅色即可終止染色
11.可以使用通用型蘇木素復(fù)染試劑盒(GMS80067.1),增強染色對比度
12.染色完成后,即刻進行光學(xué)顯微鏡觀察
13.本公司提供系列組織生物化學(xué)成分分析試劑產(chǎn)品
質(zhì)量標(biāo)準
1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定顯色清晰