技術文章
Technical articles產(chǎn)品簡介:
糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,McManus 在1946 年最先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白,該法常用來顯示糖原和其他多糖,該技術不僅能顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關物質中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛與Schiff 試劑能結合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內(nèi)其他物質,使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關鍵的步驟。
糖原PAS 染色液(真菌專用)利用真菌含有多糖,經(jīng)過碘酸氧化暴露出醛基,醛基與無色Schiff 結合呈現(xiàn)紅色。該染色法性能穩(wěn)定,特異性強;操作簡捷,僅需0.5h; 低濃度過碘酸更適用于真菌染色,無鹽酸乙醇分化液分化步驟。
產(chǎn)品組成:
自備材料:
1、蒸餾水
2、系列乙醇
操作步驟(僅供參考):
1、常規(guī)固定(常采用 10%中性福爾馬林), 常規(guī)脫水包埋。脫蠟至水。
2、入過碘酸溶液,室溫氧化 5~10min。
3、自來水沖洗 2 次,蒸餾水浸洗 2 次。
4、入 Schiff Reagent 并加蓋,置于室溫陰暗處浸染 10~20min。5、亞硫酸鈉溶液滴洗 2 次,每次 2min。
6、流水沖洗 2min。
7、Mayer 蘇木素復染核 2~5min。
8、流水沖洗 5min。
9、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固。
染色結果:
真菌 紫紅色
細胞核 藍色
備注:顏色深淺很大程度上取決于樣品在過碘酸溶液和Schiff Reagent 中作用時間的長短。
陰性對照(可選):
1、取淀粉酶 1g 溶解于 PBS(pH5.3) 100ml,處理 30~60min,與其他樣本共同入過碘酸溶液。結果應為陰性。
2、(備選方案)取唾液片(過濾后用)處理 30~60min,與其他樣本共同入過碘酸溶液。結果應為陰性。
3、(備選方案)如果對照片采用其自身樣本,對照片不經(jīng)過碘酸溶液這一步,直接入 Schiff
Reagent。結果應為陰性。
注意事項:
1、過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時的溫度以 18~22℃最佳。
2、過碘酸溶液、Schiff Reagent 使用時避免接觸過多的陽光和空氣,使用前最好提前
30min 取出恢復至室溫,避光暗處使用。
3、過碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用時間非常重要,該依據(jù)切片厚薄、細胞或組織的類別等決定。
4、如常規(guī)切片建議用糖原PAS 染色液(DG0005),其過碘酸和蘇木素濃度都相對高。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個月有效。