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ELISA試劑盒的樣品收集、處理及保存方法

更新時間:2021-06-27點擊次數(shù):843
  ELISA試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標板、酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標準品或樣品溶液,樣本中的藥物和酶標板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗藥物抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含藥物含量成負相關(guān),與標準曲線比較即可得出樣本中藥物的殘留量。
  ELISA試劑盒的樣品收集、處理及保存方法:
  1、血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
  2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
  3、細胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
  4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
  5、保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。-20℃取出后建議放入2~8℃冰箱中解凍約,每隔一段時間輕輕搖晃均勻,不可直接放入溫度較高處解凍,避免因溫度改變太大,造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀,血清的質(zhì)量下降。若短期無法用完一瓶,建議無菌分裝,再放回冷凍,避免反復(fù)凍融。4℃長時間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,形成絮狀物質(zhì)變差。
  在成批手藝檢測中,還應(yīng)留神操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反響和酶促反響時間不一致,對競爭法及定量檢測影響很大,不留神可能會導(dǎo)致過錯效果或定量不準。