技術(shù)文章
Technical articlesRhodamine 123 是一種可以通過細(xì)胞膜的選擇性染色活細(xì)胞線粒體的熒光染料,呈黃綠色熒光,多用于檢測(cè)線粒體膜電位,也常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)。它可以快速通過細(xì)胞膜,僅需幾分鐘就可以被具有活性的線粒體所俘獲,并且對(duì)細(xì)胞沒有任何毒性。Rhodamine 123 還用于對(duì)許多種細(xì)胞進(jìn)行染色,包括植物細(xì)胞和細(xì)菌,由于細(xì)胞內(nèi) ATP 的量與 Rh123 的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性,因此 Rh123 也被用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 ATP。
操作步驟(僅供參考):
1、取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,將細(xì)胞密度調(diào)整到 3×105 個(gè)/ml 接種至6孔板,培養(yǎng)24h,同時(shí)應(yīng)設(shè)立陰性對(duì)照。
2、在各細(xì)胞中加入所需干預(yù)措施,繼續(xù)培養(yǎng)一定時(shí)間后,收集細(xì)胞,PBS清洗2次。
3、1ml PBS重懸細(xì)胞與EP管中,加入1ul Rhodamine 123(0.5mg/ml),37℃避光孵育20min。
4、流式細(xì)胞儀(激發(fā)波長(zhǎng)511nm,發(fā)射波長(zhǎng)534nm)或熒光顯微鏡下檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、 對(duì)于6孔板中的樣品,本試劑共可以檢測(cè)100個(gè)樣品;對(duì)于12孔中的樣品,本試劑共可以檢測(cè)200個(gè)樣品。
2、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:12 個(gè)月有效。