技術文章
Technical articles主要用途
冰凍切片總游離膽固醇菲律賓(FILIPIN)熒光染色試劑是一種旨在通過熒光染料菲律賓(FILIPIN)特異性與膽固醇結合,形成復合體,并產(chǎn)生藍色熒光現(xiàn)象的經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心改良、成功實驗證明的。主要適用于冰凍切片組織游離膽固醇分布的檢測。廣泛用于組織病理生理的研究。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,熒光清晰。
產(chǎn)品內(nèi)容
清理液(Reagent A) 毫升
固著液(Reagent B) 毫升
抗干擾液(Reagent C) 毫升
染色液(Reagent D) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存染色液(Reagent D)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里;有效保證6月
用戶自備
熒光顯微鏡:用于樣品染色后觀察分析
實驗步驟
一、 樣本固著處理
1. 取出待測的5至10微米厚的冰凍切片(注意:使用快速冷凍處理-snap frozen的冰凍切片,不宜使用包埋處理)
2. 小心加上xx微升清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個樣品表面
3. 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
4. 重復實驗步驟2至3二次
5. 小心加上xx微升固著液(Reagent B),鋪滿整個樣品表面
6. 室溫下孵育30分鐘
7. 小心移去切片上的固著液(Reagent B)
8. 小心加上xx微升清理液(Reagent A),清洗樣品表面
9. 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
10. 重復實驗步驟8至9二次
二、樣本染色處理
1. 小心加上xx微升抗干擾液(Reagent C),鋪滿整個切片樣品表面
2. 室溫下孵育10分鐘
3. 小心移去切片上的抗干擾液(Reagent C)
4. 小心加上xx微升染色液(Reagent D),鋪滿整個切片樣品表面
5. 室溫下孵育30分鐘,避免光照
6. 小心移去切片上的染色液(Reagent D)
7. 小心加上xx微升清理液(Reagent A),清洗樣品表面
8. 小心移去切片上的清理液(Reagent A)
9. 重復實驗步驟7至8二次
10. 即刻放上蓋玻片或封片
11. 在熒光顯微鏡下觀察:激發(fā)波長:340nm;散發(fā)波長:430nm――膽固醇陽性呈現(xiàn)藍色熒光
注意事項
1. 本產(chǎn)品為50次操作
2. 操作時,須戴手套
3. 操作時,避免污染母液
4. 試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面
5. 樣品染色完成后,即刻進行熒光顯微鏡觀察
6. 熒光容易受到光漂白(photobleach),建議使用抗淬滅劑Ⅰ-12058.2
7. 本產(chǎn)品染色后,可用于電鏡分析
8. 本公司提供系列組織細胞生物化學成分染色試劑產(chǎn)品
質量標準
1. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰