技術(shù)文章
Technical articles產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
紅細(xì)胞酶缺陷的檢查可通過(guò)高鐵血紅蛋白還原實(shí)驗(yàn)、抗壞血酸、Heinz 小體等檢測(cè), 高鐵血紅蛋白還原檢測(cè)試劑盒采用 Schumm 法,其檢測(cè)原理是在有足夠的NADPH 存在下,高鐵血紅蛋白能被高鐵血紅蛋白還原酶還原成亞鐵血紅蛋白,當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi)葡萄糖-6-磷酸脫氫酶含量正常時(shí),由磷酸戊糖代謝途徑生成的 NADPH 的數(shù)量足以完成上述還原反應(yīng)當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi) G6PD 含量不足或缺乏時(shí),高鐵血紅蛋白還原速度減慢,甚至不能還原,高鐵血紅蛋白呈褐色,用分光光度計(jì)在 635nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
名稱 | 規(guī)格 50T | Storage |
試劑(A): 抗凝劑 | 5ml | 4℃ |
試劑(B): Hb Assay Buffer | 1.5ml | 4℃ |
試劑(C): Hb 顯色液 | 1.5ml | 4℃ 避 光 |
試劑(D): G6PD Buffer | 100ml | 4℃ |
使用說(shuō)明書(shū) | 1 份 |
自備材料:
1、離心管或試管
2、水浴鍋或恒溫箱
3、比色杯
4、分光光度計(jì)
操作步驟(僅供參考):
1、取新鮮靜脈血 0.9ml,加入抗凝劑 0.1ml,充分混勻。
2、低速離心 15min,取出,調(diào)整血細(xì)胞與血漿比例為 1:1 后再混勻。
3、取上述抗凝血 0.5ml,加入 Hb Assay Buffer 和 Hb 顯色液各 0.025ml,顛倒混勻 15 次,使與氧氣充分接觸,加塞或密封后放置于 37℃水浴鍋或恒溫箱中孵育 3h?;靹?, 取上述血液 0.02ml 加入 G6PD Buffer 2ml。
上述操作,可見(jiàn)下表:
加入物(ml) | 空白管 | 測(cè)定管 |
抗凝血 | 0.5 | 0.5 |
Hb Assay Buffer | - | 0.025 |
Hb 顯色液 | 0.025 | 0.025 |
混勻,放置于 37℃水浴鍋或恒溫箱中孵育 3h。 | ||
取上述反應(yīng)液 | 0.02 | 0.02 |
G6PD Buffer | 2 | 2 |
4、混勻,室溫放置 2min,比色杯光徑 1cm,用分光光度計(jì) 635nm 處測(cè)定空白管和測(cè)定管吸光度,分別命名為 SA 和 B。
5、向空白管加入 Hb Assay Buffer 0.025ml,混勻,室溫放置 5min,再次用分光光度計(jì)
635nm 處測(cè)定空白管吸光度命名為 ST。
計(jì)算:高鐵血紅蛋白還原率(%)={1-(SA-B)/(ST-B)}×100% 參考區(qū)間:一般應(yīng)超過(guò) 75%
1、 紅細(xì)胞比容低于 30%時(shí),高鐵血紅蛋白還原率顯著下降,需調(diào)整紅細(xì)胞與血漿的比例。
2、 樣本不應(yīng)有凝血或溶血,以免影響測(cè)定。
3、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期:6 個(gè)月有效。