技術文章
Technical articles主要用途
石蠟切片黑色素去色(bleach)試劑是一種旨在使用標準化的化學分離石蠟方法的基礎上,通過氧化劑處理,使黑色素由棕色變成無色,來識別存檔中的石蠟包埋組織切片中黑色素成分的而經典的技術方法。該技術經過精心改良傳統(tǒng)方法、成功實驗證明的。主要適用于各種石蠟包埋組織切片中的黑色素成分,尤其是腫瘤細胞的黑色素去色檢測。產品即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,去色明顯。
保存方式
保存在4℃冰箱里;試劑具有腐蝕性,注意操作安全;有效保證6月
用戶自備
小型染色缸:用于組織染色操作
烘箱:用于脫蠟處理
光學顯微鏡:用于組織染色后觀察分析
實驗步驟
一、 脫蠟處理
1. 取出10片待測的石蠟包埋的5微米厚組織切片
2. (選擇步驟)放進80℃烘箱,孵育30分鐘
3. (選擇步驟)室溫下靜置15分鐘
4. 按下表依次放進小染色缸里孵育
1. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)
二、 去色處理
1. 小心加上500微升氧化液(Reagent F),鋪滿整個樣品表面
2. 室溫下,孵育5分鐘(注意:可以延長至2小時,例如眼晴組織)
3. 小心移去切片上的氧化液(Reagent F)
4. 室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(Reagent E)中孵育2分鐘
5. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)
6. 小心加上200微升去色液(Reagent G),鋪滿整個樣品表面
7. 室溫下,孵育1至2分鐘,或直至無色
8. 小心移去切片上的去色液(Reagent G)
9. 室溫下,小心將切片置入50毫升清理液(Reagent E)中孵育2分鐘
10. 小心移去切片上的清理液(Reagent E)
11. (選擇步驟)復染(注意:建議使用通用型蘇木素伊紅染色試劑盒-GMS10030)
12. 透明處理
13. 放上蓋玻片或封片
14. 即刻在一般光學顯微鏡下觀察:
黑色素――淺棕或深棕色變成無色(見附圖)
細胞核――藍色(復染
注意事項
1. 本產品為50次操作
2. 操作時,須戴手套
3. 脫蠟試劑可以重復使用
4. 試劑具有腐蝕性,注意操作安全
5. 試劑溶液在樣品表面時,避免有氣泡存在,同時確保鋪滿樣品表面
6. 氧化液(Reagent F)孵育時間5分鐘至2小時不等,皮膚組織為5分鐘,眼睛組織為2小時
7. 組織細胞染色完成后,即刻進行光學顯微鏡觀察
8. 本公司提供系列組織生物化學成分染色分析試劑產品
質量標準
1. 本產品經鑒定性能穩(wěn)定
2. 本產品經鑒定去色明顯