技術文章
Technical articles產(chǎn)品簡介:
螺旋體(spirochaeta)是一類細長、彎曲呈螺旋狀、運動活潑的原核細胞型微生物,具有細菌的基本結構,細胞壁有脂多糖和壁酸,螺旋體分為密螺旋體(如梅毒螺旋體)、疏螺旋體(如回歸熱螺旋體)、鉤端螺旋體等;梅毒螺旋體有 8~12均勻的螺旋,兩端尖直;鉤端螺旋體細長,數(shù)目較多而且細密,一端或兩端彎曲呈鉤狀,菌體亦常屈曲呈C形或S形。梅毒螺旋體和鉤端螺旋體可用鍍銀法進行顯色,如 Levaditi 法、Warthin-Starry 法。
螺旋體染色液(Levaditi 銀法)是利用螺旋體具有的嗜銀性,在一定條件下螺旋體可從銀液中吸附銀離子,經(jīng)還原液處理后,螺旋體內吸附的銀離子被還原為黑色的金屬 銀而顯色,主要用于顯示梅毒螺旋體,亦可顯示鉤端螺旋體,但較少顯示熱回歸螺旋體,對肝臟梅毒樹膠腫和肝臟鉤端螺旋體具有鑒別作用。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考):
1、組織切片厚度1~2mm 為佳,置于10%福爾馬林中固定2~4天。
2、流水沖洗過夜。
3、95%乙醇浸泡24h,蒸餾水浸洗并不停搖動,直至組織下沉為止。
4、更換新的蒸餾水浸洗 10min。
5、入銀溶液加蓋置于37℃恒溫箱孵育1天,更換新的銀溶液,繼續(xù) 37℃恒溫箱孵育2 天。
6、蒸餾水浸洗3次,每次10min。
產(chǎn)品組成:名稱 | 規(guī)格 3×50ml |
Storage | |
試劑(A):銀溶液 | 2×50ml | RT 避 光 | |
試 劑 (B): Levaditi 還原液 | B1: Levaditi 還原液 A | 25ml | RT 避 光 |
B2: Levaditi 還原液 B | 25ml | RT | |
臨用前,按 B1:B2=1:1 混合,即為 Levaditi 還原液,即配即用。 | |||
使用說明書 | 1 份 |
7、入配制好的 Levaditi 還原液,加蓋室溫避光孵育2天。
8、蒸餾水浸洗3次,每次 2min。
9、常規(guī)脫水透明,浸蠟包埋。
10、切片厚度6~8μm,貼片,烤干。
11、二甲苯或 脫蠟透明液脫蠟 2 次,中性樹膠封固。
染色結果:
梅毒螺旋體、鉤端螺旋體 | 黑色或棕黑色 |
背景 | 淡黃至棕黃色 |
注意事項:
1、 實驗所用器皿需用硫酸洗液浸泡,洗干凈。
2、 步驟4、5的洗片步驟很有必要,一定要把組織中的甲醛和乙醇充分清除,否則易導致組織內銀鹽的沉淀。
3、 某些細菌和真菌菌絲也會被該染液染成黑色,應注意螺線體為螺旋狀形態(tài),并加以鑒別。
4、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5、 試劑開封后請盡快使用,以防影響后續(xù)實驗效果。
有效期:12個月有效。