基本信息

產品名稱： H9C2細胞;大鼠心肌細胞

產品編號： CL0111

細胞數量： 1*10^6

組織來源： 心肌

細胞種屬： 大鼠源

生長特性： 貼壁

培養(yǎng)基： DMEM

形態(tài)特征： 形態(tài)成肌細胞

傳代方法： 推薦1：2到1：4的傳代比例

培養(yǎng)條件： 胎牛血清至終濃度為10％。環(huán)境：空氣，95％;二氧化碳（CO2），5％；溫度，37℃

細胞描述： H9c2（2-1）是由B.Kimes和B.Brandt從胚胎BD1X大鼠心臟組織衍生的原始克隆細胞系的亞克隆，并且表現出骨骼肌的許多特性。該系中的成肌細胞將融合形成多核肌管并響應乙酰膽堿刺激。 如果培養(yǎng)基中的血清濃度降至1％，則融合發(fā)生得更快。

細胞凍存： 液氮凍存（凍存液基礎培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO）

細胞運輸： 干冰運輸（2ml凍存管）或活細胞運輸（T25瓶）

注意事項

凍存細胞接收后的處理：

1.干冰運輸，收到細胞后立即轉入-80℃冰箱短暫中轉或直接復蘇；
2.收到細胞后，若發(fā)現干冰已經*揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯系。

復蘇細胞接收后的處理：

1.收到細胞后，請首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液，培養(yǎng)液是否混濁，如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請立即拍照把圖片發(fā)給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認細胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
3.建議收到當天不要消化處理，如果細胞長滿90%，可選擇傳代處理。
4.如您收到細胞3天內沒有反饋相關問題，出現的細胞問題將不提供免費重發(fā)服務。

細胞培養(yǎng)方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

友情提示：僅供科研實驗，不得用于其他用途。

我公司試劑盒均提供免費的代測業(yè)務，客戶只需提供所需的化驗樣本，公司專業(yè)實驗室技術人員將在一周時間內提供客戶所需要的所有數據，并以報告的實行反饋客戶。如自測客戶在發(fā)表論且在論文中提及我公司名稱我公司可提供豐厚獎學金進行獎勵。

    溫馨提示：做好個人防護，安全實驗操作。

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