基本信息

產(chǎn)品名稱(chēng)：氯霉素檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

規(guī)格：96T

介紹：

 1 原理及用途

本試劑盒采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法檢測(cè)水產(chǎn)組織、畜禽組織、肝臟、蛋類(lèi)、蜂蜜、牛奶、飼料及水等樣本中的氯霉素藥物（Chloramphenicol，CAP），試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測(cè)時(shí)，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本溶液，樣本中的氯霉素藥物和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗氯霉素藥物抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含氯霉素藥物含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中氯霉素藥物的殘留量。

2 技術(shù)指標(biāo)

2.1 試劑盒靈敏度：0.025ppb(ng/ml)

2.2 反應(yīng)模式：25℃，30min～30min～15min

2.3 檢測(cè)下限：

組織、肝臟、蜂蜜、牛奶……………0.0125ppb

水樣……………………………………0.05ppb

蛋類(lèi)……………………………………0.1ppb

尿液、血清、腸衣、飼料、奶粉……0.025ppb

2.4 交叉反應(yīng)率：

氯霉素 …………………………………100%

甲砜霉素、氟甲砜霉素………………＜0.1%

 2.5 樣本回收率：

組織、肝臟……………………………85%±20%

蜂蜜、腸衣、蛋類(lèi)……………………85%±25%

牛奶、飼料……………………………75%±25%

尿液、血清……………………………70%±20%

水樣……………………………………90%±20%

3 試劑盒組成

酶標(biāo)板……………………………96孔

標(biāo)準(zhǔn)液：各1ml

0ppb、0.025ppb、0.075ppb、0.225ppb、0.675ppb、2.025ppb

高標(biāo)準(zhǔn)液（紅蓋）：100ppb………1ml

酶標(biāo)記物（紅蓋）…………………11ml

抗體工作液（藍(lán)蓋）………………5.5ml

底物液A（白蓋）……………………6ml

底物液B（黑蓋）……………………6ml

終止液（黃蓋）………………………6ml

20×濃縮洗滌液（白蓋）……………40ml

2×復(fù)溶液（黃蓋）…………………50ml

說(shuō)明書(shū)…………………………………1份

蓋板膜…………………………………1張

自封袋…………………………………1個(gè)

4 需要的器材和試劑

4.1 儀器：酶標(biāo)儀、打印機(jī)、均質(zhì)器 、氮?dú)獯蹈裳b置、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平（感量0.01g）

4.2 微量移液器：?jiǎn)蔚?0µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl

4.3 試劑：乙酸乙酯、正己烷、醋酸鈉、醋酸

、、葡萄糖苷酸酶、硫酸鋅（ZnSO4·7H2O）

5 樣本前處理

5.1 樣本處理前須知：

實(shí)驗(yàn)器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

5.2 配液：

配液1：0.36M亞硝基鐵溶液（牛奶、奶粉樣本）

10.7g亞硝基鐵加去離子水混勻溶解，定容至100ml。

配液2：1.04M硫酸鋅溶液（牛奶、奶粉樣本）

    29.8g硫酸鋅加去離子水混勻溶解，定容至100ml。

配液3：0.1M pH4.8醋酸鈉緩沖液（尿液樣本）

    2.4g醋酸鈉加去離子水混勻溶解，定容至500ml，再加1.2ml醋酸混勻。

配液4：復(fù)溶液（若檢測(cè)樣本為水樣，請(qǐng)勿稀釋?zhuān)苯邮褂茫?/font>

將2×復(fù)溶液用去離子水2倍稀釋?zhuān)?份2×復(fù)溶液加1份去離子水），用于樣本的復(fù)溶，復(fù)溶液在4℃環(huán)境可保存一個(gè)月。

配液5:工作洗滌液

    將濃縮洗滌液20倍稀釋(1份洗滌液加19份去離子水)。

5.3 樣本前處理步驟：

5.3.1 組織、魚(yú)、蝦、肝臟樣本處理方法 

1）稱(chēng)取均質(zhì)后的樣本3±0.05g于50ml離心管中，先加入3ml去離子水振蕩混勻，再加入6ml乙酸乙酯振蕩2分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘；

2）取上層液體2ml在50-60℃下氮?dú)獯蹈桑?/font>

3）用1ml正己烷溶解干燥的殘?jiān)?，再加?.5ml復(fù)溶液，混合30秒，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘；

4）去除上層有機(jī)相，取下層水相50μl進(jìn)行分析。

    樣本稀釋倍數(shù)：0.5    檢測(cè)下限：0.0125ppb

5.3.2 血清、血漿樣本處理方法

1）取1ml血清或血漿至離心管中，加入2ml乙酸乙酯振蕩1分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，或靜置使水相與有機(jī)相分離；

2）取1ml上層液體在50-60℃下氮?dú)獯蹈桑?/font>

3）用1ml正己烷溶解干燥的殘?jiān)?，再加?.5ml復(fù)溶液，混合30秒，室溫4000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘；

4）去除上層有機(jī)相，取下層水相50μl進(jìn)行分析。

    樣本稀釋倍數(shù)：1    檢測(cè)下限：0.025ppb

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