產(chǎn)品名稱： 3D4/21細(xì)胞;豬肺泡巨噬細(xì)胞

產(chǎn)品編號(hào)： CL0007

細(xì)胞數(shù)量： 1*10^6

組織來源： 肺

細(xì)胞種屬： 其他源

生長特性： 貼壁

培養(yǎng)基： RPMI-1640+10%FBS+1.5g/l NaHCO_3+4.5g/l glucose+10mM HEPES+1.0mM Na-Pyruvate+0.1mM NEAA

形態(tài)特征： 巨噬細(xì)胞

傳代方法： 1:6 - 1:8

培養(yǎng)條件： 胎牛血清至終濃度為10％。環(huán)境：空氣，95％;二氧化碳（CO2），5％；溫度，37℃

細(xì)胞描述： 親本株3D4于1998年12月用pSV3neo質(zhì)粒轉(zhuǎn)染原代豬肺泡巨噬細(xì)胞培養(yǎng)物后穩(wěn)定。該質(zhì)粒帶有新霉素抗性基因和SV40大T抗原。

細(xì)胞凍存： 液氮凍存（凍存液基礎(chǔ)培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO）

細(xì)胞運(yùn)輸： 干冰運(yùn)輸（2ml凍存管）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T25瓶）

注意事項(xiàng)

凍存細(xì)胞接收后的處理：

1.干冰運(yùn)輸，收到細(xì)胞后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱短暫中轉(zhuǎn)或直接復(fù)蘇；
2.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已經(jīng)*揮發(fā)、凍存管瓶蓋破裂脫落,請(qǐng)立即拍照后與我們聯(lián)系。

復(fù)蘇細(xì)胞接收后的處理：

1.收到細(xì)胞后，請(qǐng)首先檢查培養(yǎng)瓶是否破損或漏液，培養(yǎng)液是否混濁，如有漏液及培養(yǎng)液混濁情況請(qǐng)立即拍照把圖片發(fā)給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養(yǎng)箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細(xì)胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養(yǎng)基接種至新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
3.建議收到當(dāng)天不要消化處理，如果細(xì)胞長滿90%，可選擇傳代處理。
4.如您收到細(xì)胞3天內(nèi)沒有反饋相關(guān)問題，出現(xiàn)的細(xì)胞問題將不提供免費(fèi)重發(fā)服務(wù)。

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

 產(chǎn)品用途：僅用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床診斷

二、蛋白圖譜
暫無

四 、產(chǎn)品優(yōu)勢介紹:

  1、本品采用天然抗體包被而成，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡便等特點(diǎn)。
  2、部分指標(biāo)產(chǎn)品采用進(jìn)口原裝抗體包被，質(zhì)量放心可靠。
  3、可提供免費(fèi)打代測服務(wù)，山東省內(nèi)可上門取樣。
  4、一次購買十盒或一個(gè)月累計(jì)購買十盒可享受經(jīng)銷商提貨價(jià)。
  5、可為 自測可戶提供全程。
五、選購原則：
  1·是檢測抗體還是抗原。 
  2·檢測的結(jié)果是定性還是定量。 
  3·是否需要檢測特異抗體的類型。 
  4·所用抗體/單克隆抗體的親和力/親和力怎么樣 
[1]檢測抗原
??常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法，其次是競爭法，但競爭法
在具體 實(shí)驗(yàn)中有些困難;特別是檢測微生物的抗原，因?yàn)槠湫铇?biāo)記抗原，對(duì)于
某些抗原很難做到甚至是不可能的。在競爭法中，沒標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合
在一起，許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì)（例如糞便），可影響elisa結(jié)
[2]檢測抗體 
??檢測抗體種類常用的方法是檢測抗體種類的捕獲法，這個(gè)方法用于檢測特異性
IgG,IgA盒IgM。這個(gè)方法的*步是因相捕獲的抗體是否是特異抗原的抗體。
間接elisa在家側(cè)IgG時(shí)比較簡單，但不適用于檢測其他種類的抗體。

八、試劑盒使用中的注意事項(xiàng)：
  1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用
  完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
  3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣
  時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
  3、請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣
  本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定
  ，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。 
  4、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
  5、底物請(qǐng)避光保存。 
  6、嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn). 
  7、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。 
  8、本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
七、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖：
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

八、3D4/21細(xì)胞;豬肺泡巨噬細(xì)胞合作單位：
  中國醫(yī)科大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、北京大學(xué)、貴陽醫(yī)學(xué)院、中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
  天津疾控中心、江南大學(xué)、山東大學(xué)、青島大學(xué) 、香港大學(xué)
  云南省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院
上游產(chǎn)品 ：

下游產(chǎn)品：