ADF培養(yǎng)基主要由磷酸鹽、檸檬酸、葡萄糖、葡萄糖酸、等組成,并含有眾多微量元素,如錳、鋅、銅、鐵、等金屬離子等,經(jīng)無菌處理。該試劑含 ACC(1-氨基羰酰-1-環(huán)丙烷羧酸)。DF培養(yǎng)基常與ADF培養(yǎng)基聯(lián)合使用,用于分析細(xì)菌的 ACC脫氨酶特性,菌株置于ADF培養(yǎng)基中的生長要好于 DF培養(yǎng)基,說明該菌株能夠以ACC氮源進(jìn)行生長,即該菌株能夠產(chǎn)生ACC脫氨酶。
自備材料:
1、DF培養(yǎng)基、NDF培養(yǎng)基(選做)
2、搖床
3、比色杯
4、分光光度計(jì)
5、無菌離心管或培養(yǎng)器皿
6、接種環(huán)
操作步驟 (僅供參考) :
1、取無菌離心管或培養(yǎng)器皿,加入3ml ADF培養(yǎng)基、DF 培養(yǎng)基(選做)、NDF培養(yǎng)基(選做)。
2、將純化的菌株同時(shí)接種于上述ADF培養(yǎng)基、DF培養(yǎng)基(選做)、NDF培養(yǎng)基(選做)中,置于搖床 150r/min 振搖培養(yǎng) 72h。
3、觀察同一菌株在 ADF 培養(yǎng)基、DF培養(yǎng)基(選做)、NDF培養(yǎng)基(選做)三種不同培養(yǎng)基中的生長情況。
4、用分光光度計(jì)在600nm處測定各培養(yǎng)菌液的OD值,以便判斷菌株長勢。
結(jié)果:
當(dāng)菌株置于ADF培養(yǎng)基中的生長明顯好于DF培養(yǎng)基時(shí),說明該菌株能夠以ACC為氮源進(jìn)行生長,即該菌株能夠產(chǎn)生ACC脫氨酶。
注意事項(xiàng):
1、 置于 DF 培養(yǎng)基、NDF 培養(yǎng)基中培養(yǎng)是可選步驟,不是必須步驟。
2、 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。注意無菌操作,避免微生物污染。
3、 如果沒有分光光度計(jì),也可以使用普通的酶標(biāo)儀測定。